標(biāo)簽抗體,別名為抗原表位,又稱抗原決定簇,是抗原分子中決定抗原特異性的特殊區(qū)域或基團(tuán),是與抗體特異性結(jié)合的結(jié)構(gòu)或序列。
His抗體A00186是由6個(gè)組氨酸(His-His-His-His-His-His)組成的短肽,專門設(shè)計(jì)用于重組蛋白質(zhì)的吸附純化。由于分子量較小,并且較容易分離和純化,His融合標(biāo)簽與其他標(biāo)簽相比有很多明顯優(yōu)勢(shì),是目前用于純化的融合標(biāo)簽中使用廣泛的一種。
利用His標(biāo)簽可以建立一個(gè)基于融合蛋白的高效檢測(cè)和純化系統(tǒng)。His抗體可以用于檢測(cè)和His標(biāo)簽融合表達(dá)蛋白的表達(dá)、細(xì)胞內(nèi)定位,以及純化、定性或定量檢測(cè)His融合表達(dá)蛋白等。
His抗體A00186的應(yīng)用:
1、應(yīng)用于融合蛋白的純化和檢測(cè)
His抗體與目的蛋白的特異性結(jié)合,可對(duì)蛋白進(jìn)行親和純化;也可直接通過酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)、免疫印跡(WB)等方法檢測(cè)表達(dá)產(chǎn)物的蛋白質(zhì)水平。
2、應(yīng)用于相互作用的蛋白質(zhì)挖掘
將His抗體的抗體進(jìn)行熒光標(biāo)記后,用于尋找與融合蛋白相互作用的蛋白,包括配體或者受體;利用His標(biāo)簽抗體沉淀與目的蛋白相互作用的蛋白,通過分離純化與鑒定,便于進(jìn)一步的結(jié)構(gòu)及功能分析,獲取更多互作蛋白信息。
3、應(yīng)用于蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能探索
His抗體A00186可應(yīng)用與蛋白質(zhì)分子的功能研究,尤其在膜受體的功能研究領(lǐng)域;可利用抗標(biāo)簽蛋白抗體的交聯(lián)活化受體代替天然配體來研究受體的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)或功能;將標(biāo)簽插入信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子的特定結(jié)構(gòu)域還可以用來研究分子的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。